产品货号:
QN0430
中文名称:
SUMO蛋白酶
英文名称:
SUMO Protease
产品规格:
1000U
发货周期:
1~3天
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SUMO蛋白酶也称Ulp,是一种具有较高活性的半胱氨酸蛋白酶,它能识别SUMO蛋白的三级结构,而不是氨基酸序列,因此可以高效而且特异性地将SUMO蛋白从重组融合蛋白上切割下来。SUMO蛋白酶在较宽范围的反应环境体系中能保持较高的活性,如温度(4~30℃),PH(5.5-9.5)等,SUMO蛋白酶带有多聚His标签,便于融合蛋白切割后利用亲和层析去除该蛋白酶。
在1×SUMO Protease Buffer (50mM Tris-HCl,1mM DTT,pH8.0)中,30℃反应1h,剪切>85%的2μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
组分 | 规格 |
SUMO蛋白酶(5U/μL) | 200μL |
SUMO Protease Buffer | 1mL×2 |
保存:-20℃,避免反复冻融,有效期6个月。
- 为达到最好的酶切效果,请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白。
- 对于大部分融合蛋白,SUMO蛋白酶最理想的反应液中NaCl的浓度为150mM。然而,根据实际情况可在100mM~300mM之间调节NaCl的浓度以达到最佳的效果。实验中要考虑融合蛋白中盐的浓度。
- 咪唑的浓度应低于150mM,若高于该浓度会影响SUMO蛋白酶的活性
- SUMO蛋白酶与需要酶切的目的蛋白比例为1:100。
- 酶切体系:
成分 用量 融合蛋白 1000μg SUMO Protease Buffer 20μL SUMO蛋白酶 2μL ddH2O 至1mL - 酶切条件:推荐4℃酶切过夜,用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索,以下酶切分析图片可供参考。
- 酶切后可取少量样本进行SDS-PAGE分析,若要去除酶切后体系中的SUMO蛋白酶,可用His标签纯化树脂亲和层析。
酶切3h、5h、6h、7h、8h、10h、12h、22h后SDS-PAGE电泳图。
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